倒平板的实验步骤是什么？

倒平板操作：

1、将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。

右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰；

2、用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20ml）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，轻轻摇匀。

3、等待平板冷却凝固（大约需5～10min）后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。

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一、无菌准备：

1、提前1个小时打开无菌室紫外灯消毒灭菌

1、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；

2、将用于微生物培养的器皿、接种的用具和培养基等进行灭菌；

3、所有无菌操作都需在酒精灯旁操作。

二、配置培养基：

1、LB肉汤：肉汤粉330g、5g葡萄糖、1000ml蒸馏水；

2、营养琼脂培养基：琼脂培养基粉300g、5g葡萄糖、1000ml 蒸馏水。

目的是把培养基倒过来培养，防止培养液蒸发的附在上板的水蒸气倒流到培养液中。

平板要求：平板平整，无凸起；平板无“挂壁”；培养基布满整个平皿；培养基的量适宜；培养皿盖无水汽。温度在 45 度左右，最适合倒平板。如果要连续倒多个培养皿，尤其是在冬天往往容易凝固，一旦凝固则需要再加热到较高温度才能融化。

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一、防止倒皿时的冷凝

有经验的都知道，手心不烫手背烫，这是一个经验数据，此时的温度在 45 度左右，最适合倒平板。如果要连续倒多个皿，尤其是在冬天往往容易凝固，一旦凝固则需要再加热到较高温度才能融化（玻璃体的特性）。所以建议此时有个 50 度的恒温水浴开着，随时把装培养基的三角瓶放进去效果会好不少。

二、培养皿中有冷凝水

一般来说，都会有几滴，影响不大。如果过多则需要注意。大概的情况是：倒皿前将平皿最好保持在 35-40 度的温度（触手有温热感）；保持平皿静置环境温度高一些。

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